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bca法測蛋白濃度步驟與原理

bca法測蛋白濃度原理工作液為BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑，混合一起顏色變?yōu)樘O果綠，即為BCA工作試劑。在堿性條件下，BCA工作液與蛋白質(zhì)結(jié)合時，蛋白質(zhì)將二價銅離子還原為一價銅離子，一個一價銅離子螯合兩個BCA分子，工作試劑由原來的蘋果綠變成紫色，在562nM處有高的光吸收值，并與蛋白質(zhì)濃度成正比，據(jù)此繪制標準曲線，檢測蛋白的OD值，即可得到濃度值。bca法測蛋白濃度步驟步驟標準曲線的繪制：反應(yīng)體系加樣：96孔板，第一列8個孔PBS:20ul19ul18ul16ul1...

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兩種不同的總蛋白提取方法總結(jié)

蛋白質(zhì)提取與制備蛋白質(zhì)種類很多，性質(zhì)上的差異很大，既或是同類蛋白質(zhì)，因選用材料不同，使用方法差別也很大，且又處于不同的體系中，因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質(zhì)的分離。本文分別介紹了從新鮮樣品中提取總蛋白和從Trizol裂解液中分離總蛋白的方法和步驟。希望與各位老師和同學交流。膜蛋白具有多種功能，在細胞識別、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、運輸?shù)扔兄兄匾慕巧虼艘彩呛芎玫乃幬锇悬c。抽提膜蛋白主要是進行蛋白組分析：常用的實驗是非變性膠電泳、酶活分析、SDS-PAGE、western...

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單層貼壁細胞總蛋白的提取

本篇文章詳細介紹了單層貼壁細胞總蛋白的提取方法和步驟，僅供參考。另外索萊寶公司提供細胞總蛋白提取試劑盒，更加方便老師和同學順利完成單層貼壁細胞總蛋白的提取實驗。1.倒掉培養(yǎng)液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫菏箽堄嗯囵B(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2.每瓶細胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。平放輕輕搖動1min洗滌細胞，然后棄去洗液。重復(fù)以上操作兩次，共洗細胞三次以洗去培養(yǎng)液。將PBS棄凈后把培養(yǎng)瓶置于冰上。3.配制...

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索萊寶基質(zhì)膠的儲存具體要求

索萊寶基質(zhì)膠的儲存需要嚴格控制溫度、避免反復(fù)凍融，并注意環(huán)境穩(wěn)定性，以確保其生物學活性和功能不受影響。以下是具體的儲存要求：1.長期保存溫度-80℃冰箱是理想的長期儲存條件，可最大限度維持基質(zhì)膠的穩(wěn)定性和活性。若短期內(nèi)使用，也可暫存于-20℃冰箱，但需減少頻繁開啟冰箱門的次數(shù)以保持低溫環(huán)境穩(wěn)定。2.禁止使用的冰箱類型切勿將基質(zhì)膠存放在具有自動除霜功能的冰箱中。這類冰箱的溫度波動可能導(dǎo)致基質(zhì)膠提前成膠或降解，影響實驗效果。建議選擇非除霜型且溫度穩(wěn)定的專用冷藏設(shè)備。3.分裝保存原...

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蛋白保存方法詳解

生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用，但更多情況是協(xié)同作用。總的來說，蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存（1）．在低溫下保存蛋白質(zhì)對熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋...

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蛋白保存條件受那些因素影響

生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。所以蛋白保存也有干態(tài)保存和液態(tài)保存兩種。但是蛋白保存條件卻受多種因素的影響，今天分析的就是影響蛋白保存條件的因素。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用，但更多情況是協(xié)同作用。那么蛋白保存條件也比如會受到這些方面的影響。下面選擇其中幾項做詳細分析。1.空氣空氣的影響主要與潮解、微生物污染及自動氧化等有關(guān)。空氣中的微生物污染可導(dǎo)致樣品腐敗變質(zhì)...

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BCA蛋白濃度測定試劑盒檢測蛋白濃度的原理及特點

蛋白質(zhì)濃度測定是利用化學或物理方法測定蛋白質(zhì)濃度，一般蛋白濃度測定的方法有很多種，每種方法都有優(yōu)點和局限性，下面我們就具體看一下蛋白濃度測定的方法都有哪些。蛋白濃度測定的方法：1.紫外分光光度法紫外光譜吸收法測定蛋白質(zhì)含量是講蛋白質(zhì)溶液直接在紫外分光光度計中測定的方法，不需要任何試劑，操作簡單且易回收。蛋白質(zhì)溶液在280nm附近有強烈的吸收，這是由于蛋白質(zhì)中酪氨酸、色氨酸殘基而引起的，所以光密度受這兩種氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取過程中雜有的核酸對測定結(jié)果引起極大誤差，...

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赤霉素的性質(zhì)及使用方法

赤霉素又稱“920”，由四環(huán)骨架衍生而得，常用作植物激素，能促進莖、葉的生長，提早抽苔開花，促進種子、塊莖、塊根發(fā)芽，刺激果實生長,增加結(jié)果率或形成無籽果實等。赤霉素的性質(zhì)：熔點：227°C比旋光度：82.5o(c=10,ethanol)折射率：81°(C=2,MeOH)儲存條件：0-6°C水溶解性：5g/L(20oC)Merck：14,4419BRN：54346穩(wěn)定性：Stable.Combustible.Incompatiblewithacids,strongoxidiz...

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