2025-94
抗體稀釋液作為一種常用的試劑,其合理的運用能夠優化抗體的工作條件,提高檢測靈敏度并減少非特異性結合。以下是關于抗體稀釋液詳細且實用的使用方法介紹。一、準備工作在使用稀釋液之前,需要確保所有的實驗器材都處于潔凈狀態。這包括移液器、離心管、微孔板等直接接觸樣品的工具。任何雜質或污染物都可能影響抗體的活性和實驗效果。同時,要將稀釋液從冰箱中取出后放置在室溫下平衡一段時間,一般建議平衡30分鐘左右。這樣做的目的是使溶液的溫度逐漸恢復到室溫,避免因溫度差異過大而對后續的操作產生不良影響...
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2025-91
聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE(Polyacrylamide?gel?electrophoresis)聚丙烯酰氨凝膠電泳,是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成,聚合過程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝膠電泳作用:用于分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠電泳原理:常用的催化聚合方法有兩種:化學聚合和光聚合。化學聚合通常是加入催化劑過硫酸銨(AP)以及加速劑四甲基乙二胺(TEMED),四甲基乙二胺催化過硫酸銨產生自...
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2025-91
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法.其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當大,對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現廣泛應用于核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳條件電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強度0.02~0.05...
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2025-91
鏈脲佐菌素(STZ)是一種氨基葡萄糖-亞硝-基脲,是一種DNA烷基化試劑,能通過GLUT2葡萄糖轉運蛋白(GLUT2glucosetrasportprotein)獨自進入細胞。對胰腺胰島素誘發的β-細胞具毒性。STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用,能誘發許多動物產生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造動物模型。Ⅰ型糖尿病與Ⅱ型糖尿病動物模型的制備與STZ注射的給藥方式有關:采用小劑量分次給藥的方法,則建立與人類Ⅱ型糖尿病表現相似的大鼠模型,如采用較大劑量一次性注射的給藥...
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2025-91
【摘要】目的:探討鏈脲佐菌素誘導速發型SD大鼠實驗性糖尿病模型的建立。方法:采用一次性向大鼠腹腔內注射鏈脲佐菌素的方法,實驗中監測血糖,并取胰腺組織用組織化學和免疫組織化學染色,以MoticMed6.0顯微圖像分析系統分析糖尿病大鼠胰島細胞的數量改變。結果:注射48h后大鼠血糖明顯升高,并出現糖尿病表現形態學觀察到胰島萎-縮,B細胞數量明顯減少(P【關鍵詞】糖尿病;動物模型;鏈脲佐菌素;大鼠【中圖分類號]R965【文獻標識碼】A【文章編號】1673—1484(2006)04-...
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2025-91
PMA(同義名:TPA)是一種廣泛用于體內外實驗的佛波酯(phorbolester)PKC激活劑。PMA結合PKC(Ki=2.6nM)并激活其功能,在細胞和組織中都呈現出極其廣的抑制譜。PMA可以抑制Fas誘導的細胞凋亡,但又可以誘導HL-60細胞的凋亡。PMA在肝細胞中可以誘導iNOS的表達。PMA可以增強forskolin誘導的cAMP形成。PMA是一種高效的腫瘤促進劑,可以促進小鼠皮膚瘤的形成。盡管PMA毒性較強,但是在人體內仍顯示出抗白血病和抗中性白細胞減少的活性。應...
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2025-829
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而細胞凍存步驟及細胞凍存液的選擇也是影響細胞凍存效率及解凍復蘇后細胞活力的主要條件。下面就以索萊寶細胞凍存液為例講解細胞凍存原理及細胞凍存的步驟。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷...
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2025-829
什么狀態下菌體質粒DNA充分釋放?如何用試劑盒提取出質量更好的質粒?看了上一期的“滿滿的干貨(一)”,大家對于質粒DNA的濃度分析應該會有一定程度的了解,那么下面首先給大家介紹一下,如何用試劑盒提取出質量更好的質粒。首先,質粒提取的好壞,除了對吸附柱特異性要求以外,操作過程也非常重要,比如菌體的裂解程度,直接導致質粒DNA釋放充分釋放,很多人會在裂解這一步無法判斷自己是否裂解充分,下面結合圖片給大家簡單介紹一下。菌液量較少時,溶液趨于透明狀態(非充分透明),即停止裂解,避免裂...
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