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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC3980-50T/24S
更新時間：2024-04-12
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：702
010-50973130
產品分類
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土壤脂肪酶（S-LPS）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號: BC3980
規格: 50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體6 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 液體59.3 μL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
標準品：臨用前加入1.97 mL甲苯，即100 μmol/mL油酸。用前注意解凍溶解。用不完的試劑可以2-8℃保存一個月。
工作液的配制：將試劑三臨用前加入20 mL蒸餾水于沸水浴中溶解，2-8℃保存兩周。冷卻至常溫后加入5 mL試劑二混合，高速震蕩2次，每次3min，間隔5min。可根據該比例現用現配。
產品說明：
脂肪酶（LPS）又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。該酶在土壤生物動力學中具有重要的作用。
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算LPS活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、震蕩混勻器、恒溫水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液槍、研缽、甲苯（不可快遞）、冰和蒸餾水、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣自然風干，過30-50目篩。
二、測定步驟
分光光度計預熱30min以上，調節波長至710nm，甲苯調零。
標準溶液的稀釋：取50µL 100µmol/mL油酸標準溶液，加入950µL甲苯，充分混勻，配制成5µmol/mL標準溶液待測，現用現配。（實驗中每管需要1mL。）
操作表：取2mL EP管，加入下列試劑
取出離心管，小心吸取上層有機相1mL，加入另一1.5mL EP管中，按下表操作：
| 上層溶液 | 1000 | 1000 | - | - |
| 5µmol/mL標準溶液 | - | - | 1000 | - |
| 甲苯 | - | - | - | 1000 |
| 試劑四 | 250 | 250 | 250 | 250 |
反復充分震蕩混勻；室溫4000rpm離心10min，小心吸取上層有機相溶液800μL，加入1mL玻璃比色皿，于710nm處測定吸光值。記為A對照管、A測定管、A標準管、A空白管，計算ΔA測定=A測定管-A對照管，ΔA標準=A標準管-A空白管。空白管和標準管只需做1-2次。
注意事項：
1、甲苯有毒，實驗過程中需佩戴手套和口罩。
2、實驗過程中須遠離火源。
3、當吸光度大于0.8時，建議將樣本稀釋后測量（第二次加入甲苯的量增加）。
4、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材質。
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